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如何使用微生物培養基進行配置與滅菌看完就知

點擊次數:1574 發布時間:2021-02-23
  微生物培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由于微生物具有不同的營養類型,對營養物質的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以培養基的種類很多,使用的原料也各有差異,但從營養角度分析,微生物培養基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。
 
  另外,培養基還應具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。為了達到特定要求的研究,需要進行培養基配制和滅菌,那么微生物培養基該如何配制與滅菌呢?
 
  1.配制溶液
 
  向容器內加入所需水量的一部分,按照培養基的配方,稱取各種原料,依次加入使其溶解,后補足所需水分,對蛋白胨、肉膏等物質,需加熱溶解,加熱過程所蒸發的水分,應在全部原料溶解后加水補足。
 
  配制固體培養基時,先將上述已配好的液體培養基煮沸,再將稱好的瓊脂加入,繼續加熱至*融化并不斷攪拌,以免瓊脂糊底燒焦。
 
  2.調節pH值
 
  用pH試紙(或pH電位計、氫離子濃度比色計)測試培養基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH進行調節,直到調節到配方要求的pH值為止。
 
  3.過濾
 
  用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培養基過濾。用紗布過濾時,折疊成六層,用濾紙過濾時,可將濾紙折疊成瓦棱形,鋪在漏斗上過濾。
 
  4.分裝
 
  已過濾的培養基應進行分裝。如果要制作斜面培養基,須將培養基分裝于試管中。如果要制作平板培養基或液體、半固體培養基,則須將培養基分裝于錐形瓶內。
 
  分裝時,一手捏松彈簧夾,使培養基流出,另一只手握住幾支試管或錐形瓶,依次接取培養基。
 
  分裝時,注意不要使培養基粘附管口或瓶口,以免浸濕棉塞引起雜菌污染。裝入試管的培養基量,視試管和錐形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培養基時,每只15×150毫米的試管,約裝3~4毫升(1/4~1/3試管高度),如制作深層培養基,每只20×220毫米的試管約裝12~15毫升。每只錐形瓶裝入的培養基,一般以其容積的一半為宜。
 
  5.加棉塞
 
  分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣,避免污染。棉塞應采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。
 
  制作棉塞時,要根據棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時左手食指與姆指稍稍緊握,就會形成1個長棒形的棉塞。棉塞作成后,應迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應緊貼內壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。
 
  棉塞不要過緊過松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內,上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆札,準備滅菌。

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